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反相液相色譜柱操作步驟

更新時間:2022-08-16點擊次數:2347
反相液相色譜柱操作步驟
1.使用新鮮潔凈的水與乙腈。沖洗系統(tǒng),確保系統(tǒng)干凈,不含任何緩沖鹽和污染物。
2.取用色譜柱時避免磕碰掉落。
3.將反相液相色譜柱入口端連接到系統(tǒng)上,柱出口端先不要連接,色譜柱身上有箭頭標明正確流向。
4.在0.1 mL/min流速條件下用反相液相色譜柱,然后在2分鐘內將流速升至0.5 mL/min。
5.當溶劑均勻的從柱出口端流出,停流速,將反相液相色譜柱出口端接到系統(tǒng)檢測器上(這樣可以避免氣泡進入檢測系統(tǒng),并且可快速達到基線平衡)。
6.重啟流速,按照步驟4的方法逐漸提高流速,至常規(guī)分析時所使用的流速。
7.參考柱效測試報告中的方法,使用該流動相條件平衡反相液相色譜柱,通常需要使用5-10倍柱體積的流動相,直至壓力與基線穩(wěn)定。
8.測試柱效。如果沒有柱效測試報告中的分析物,請沃特世化學消耗品部門尋求支持,使用合適的濃度與進樣量。柱效結果略低于柱效測試報告屬正常情況。如結果明顯偏低、峰形拖尾,提示色譜柱和/或所使用的液相系統(tǒng)處于非理想狀態(tài),需要進行故障排查。


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